基于活性的蛋白质分析（ABPP）旨在通过特异性地标记和分析生物样本中具有活性的蛋白质，深入了解细胞内的蛋白质功能和动态变化。这项技术在生物学研究、药物筛选以及疾病机制的探索中具有重要应用，特别是在发现潜在的药物靶点、揭示酶活性及其在疾病中的角色等方面，展现了巨大的潜力。ABPP不仅能够提供对蛋白质活性的实时监测，还能结合质谱技术实现对活性蛋白质的定量和鉴定，成为研究细胞功能、疾病机制及药物研发的重要工具。基于活性的蛋白质分析（ABPP）的核心原理是利用化学探针（通常为小分子）与活性蛋白质（如酶、受体、离子通道等）发生特异性反应，并通过标记、富集和分析这些蛋白质揭示其功能状态。ABPP通常依赖于反应性化学探针，它能够特异性地与蛋白质的活性位点结合，标记蛋白质的功能区域，进而通过一系列分析手段识别和定量这些蛋白质。这一过程中，化学探针的设计至关重要，它们通常包含一个能够与目标蛋白质的活性位点反应的功能性基团（如氟化物、硫醚、烯烃等）和一个标记基团（如荧光标记、亲和标签、放射性标签等）。当化学探针与目标蛋白质结合后，标记基团可以帮助研究人员通过不同的检测方法对其进行识别和分析。

一、基于活性的蛋白质分析（ABPP）的关键步骤

基于活性的蛋白质分析（ABPP）的实验过程一般包括以下几个关键步骤：

1、设计化学探针：根据研究目的，设计特异性化学探针，探针通常包括活性位点反应基团和标记基团。化学探针的选择需根据目标蛋白质的特性来定制，以确保其对特定蛋白质的高选择性。

2、处理样本：将待分析的生物样本（如细胞裂解液、组织提取物等）与化学探针孵育。探针将与样本中的活性蛋白质发生反应，并与其活性位点结合，标记这些蛋白质。

3、富集和分离：通过亲和层析或免疫沉淀等方法，从复杂的生物样品中富集和分离标记的活性蛋白质。这个过程有助于从杂乱无章的蛋白质组中提取出目标蛋白质。

4、分析与鉴定：使用质谱（MS）或其他分析技术（如荧光成像、凝胶电泳等）对富集的标记蛋白质进行分析。质谱分析可以准确地确定蛋白质的氨基酸序列，进而识别活性蛋白质及其翻译后修饰。

5、数据分析：通过比对数据库，结合实验数据识别活性蛋白质，并根据其功能特性进一步分析其在特定生物过程中可能的作用。基于活性的蛋白质分析不仅可以揭示蛋白质的定性信息，还能够提供关于蛋白质活性变化、相互作用以及潜在药物靶点的定量数据。

二、基于活性的蛋白质分析（ABPP）的分析方法

基于活性的蛋白质分析（ABPP）涉及多种分析方法，最常用的包括：

1、质谱分析（MS）：质谱分析是ABPP中最重要的技术之一，能够提供高精度的蛋白质鉴定与定量信息。结合串联质谱（MS/MS）技术，ABPP不仅能识别活性蛋白质，还能分析其翻译后修饰和相互作用网络。

2、荧光成像：荧光标记的探针能够通过荧光显微镜进行实时观察，直观地展示活性蛋白质在细胞内的分布及其动态变化。

3、凝胶电泳：通过SDS-PAGE凝胶电泳技术，可以分离标记的蛋白质，并结合荧光或放射性标签，进一步分析目标蛋白的分子量和表达情况。

4、蛋白质芯片：基于蛋白质芯片的ABPP技术能够在高通量筛选中同时检测多个蛋白质的活性，尤其适用于药物筛选和酶活性研究。

5、高通量筛选（HTS）：基于活性的蛋白质分析（ABPP）可以与高通量筛选结合，帮助研究人员快速筛选具有活性的小分子抑制剂或激动剂，为药物开发提供有效支持。

三、基于活性的蛋白质分析（ABPP）的技术应用

基于活性的蛋白质分析（ABPP）广泛应用于多个领域，特别是在药物研发和疾病机制研究方面，展现了巨大的应用潜力。

1、疾病机制研究：ABPP技术可以帮助研究人员揭示不同疾病状态下蛋白质活性的变化。例如，在癌症研究中，ABPP能够识别与肿瘤发生发展相关的关键酶类和受体，揭示其在肿瘤细胞中的异常激活模式，为癌症治疗提供新的靶点。

2、药物筛选与靶点发现：ABPP能够有效识别蛋白质活性的变化，帮助科研人员在药物筛选中发现新的药物靶点，并通过与小分子化合物的结合，验证其作为潜在药物靶点的活性。

3、酶学研究：ABPP在酶学研究中发挥了重要作用，能够精确测量不同酶的活性及其在生物体内的作用，尤其是对一些难以研究的酶类，如蛋白酶、脂肪酶等，ABPP能够提供前所未有的解析能力。

4、翻译后修饰研究：通过结合ABPP和质谱技术，研究人员可以深入了解蛋白质的翻译后修饰（如磷酸化、甲基化等）如何调节其活性，揭示蛋白质功能的多样性。

基于活性的蛋白质分析（ABPP）作为一种高度灵敏且特异的技术已经成为现代生命科学研究中的重要工具。它不仅能够帮助科研人员精准鉴定活性蛋白质，分析其功能，还能够揭示蛋白质在生物学过程中复杂的动态变化和相互作用。随着技术的不断进步，ABPP在疾病研究、药物筛选和蛋白质功能研究中的应用前景愈加广阔。百泰派克生物科技作为领先的蛋白质组学服务公司，凭借先进的质谱平台和丰富的技术经验，为客户提供高效、精准的ABPP分析服务，助力科研人员在蛋白质活性研究中取得更大的突破。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

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3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

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